皮膚變態(tài)反應試驗基本流程包括哪些

649次 2024.12.30

　　皮膚變態(tài)反應試驗的主要目的是檢測某種物質在重復接觸后是否會引起皮膚變態(tài)反應及其強度?。這種試驗通常用于評估化妝品、消毒劑或其他產(chǎn)品及其原料對皮膚的潛在影響?。


　　皮膚變態(tài)反應試驗方法概述


　　局部封閉涂皮試驗（Buehlertest,BT）和豚鼠最大值試驗（）guineapigmaximisationtest,GPMT）是實驗動物通過多次皮膚涂抹（誘導接觸）或皮內注射受試物10d~14d（誘導階段）后，給予激發(fā)劑量的受試物，觀察實驗動物，并與對照動物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應強度。


　　小鼠局部淋巴結分析試驗（locallymphnodeassay,LLNA）是通過耳部給予實驗動物受試物，引起淋巴結的淋巴細胞增生，淋巴細胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標記方法，測定試驗組與對照組淋巴細胞的標記率，并進行對比，獲得刺激指數(shù)，評價致敏強度。


　　皮膚變態(tài)反應試驗基本流程


　　(1)?準備實驗動物?：選用皮膚完好的健康白色豚鼠，雌雄各半，體重在200g～300g之間。將豚鼠隨機分為試驗組、陰性對照組和陽性對照組，每組動物至少16只?。


　　(2)?誘導處理?：對試驗組豚鼠，給予受試物誘導和激發(fā)處理。陽性對照組給予陽性致敏物（如2,4-二硝基氯苯）誘導和激發(fā)處理。陰性對照組僅給以受試物激發(fā)處理。誘導處理濃度允許引起皮膚輕度刺激反應，激發(fā)濃度低于誘導濃度，不得引起原發(fā)性刺激反應。如果原液不引起皮膚刺激反應，誘導和激發(fā)均使用原液?。


　　(3)?皮膚處理?：在試驗前24小時，將豚鼠背部左側3cm×3cm范圍內的毛發(fā)去除。取誘導濃度的消毒劑溶液（或原液）0.5ml（g），直接涂在2cm×2cm左側去毛皮膚上或滴于同樣大小的2層紗布上，再將其敷貼在左側去毛區(qū)。用一層無刺激塑料膜或油紙覆蓋，再用無刺激膠布固定，持續(xù)6小時。第7天至第14天進行激發(fā)處理?。


　　(4)?激發(fā)處理?：經(jīng)過一定間歇期后，在動物背部去毛皮膚給予激發(fā)劑量的受試物后暴露于一定劑量的紫外線（日光）下，觀察實驗動物并與對照動物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應強度?。


　　(5)?觀察結果?：記錄并比較各組動物的皮膚反應強度，評估受試物的致敏性和光變態(tài)反應的可能性?。


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