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皮膚變態(tài)反應試驗方法及標準有哪些

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2024.12.30

　　皮膚變態(tài)反應就是常說的皮膚過敏性疾病，主要是指人體接觸某些過敏原后，導致皮膚黏膜發(fā)炎而引起的一系列過敏癥狀。且過敏原可以分為吸入過敏原，接觸過敏原，食入過敏原，注射過敏原等等。不同過敏原引起不同的過敏反應，主要表現(xiàn)為皮膚紅腫、紅斑、水泡、濕疹、脫皮，并伴有明顯的瘙癢感。

　　皮膚變態(tài)反應試驗的原理是將一種物質(zhì)接觸到皮膚上，觀察皮膚的反應，以評估該物質(zhì)對皮膚的反應性。該試驗可以幫助研究人員評估產(chǎn)品的安全性和有效性。

　　皮膚變態(tài)反應試驗方法

　　一、局部封閉涂皮試驗方法（BuehlerTest,BT）：

　　?動物準備?：選擇健康、成年雄性或雌性豚鼠，雌性動物應未孕或未曾產(chǎn)仔。實驗動物環(huán)境應與動物等級相匹配并符合國家相應規(guī)定。實驗動物飼料應選用標準配合飼料，并注意補充適量維生素C?。

　　?誘導接觸?：在試驗前24小時，用脫毛劑將豚鼠背部左側(cè)3cm×3cm范圍去毛。將受試物0.1~0.2ml涂在2cm×2cm濾紙上，并將其敷貼在去毛區(qū)，用二層紗布、一層油紙和無刺激膠布固定，持續(xù)6小時。第7天和第14天以同樣方法重復一次?。

　　?激發(fā)接觸?：末次誘導后14~28天，將0.1~0.2ml受試物斑貼于豚鼠背部左側(cè)2cm×2cm去毛區(qū)，用二層紗布、一層油紙和無刺激膠布固定6小時。激發(fā)接觸后24和48小時觀察皮膚反應，按表評分?。

　　二、豚鼠最大值試驗方法（GuineaPigMaximisationTest,GPMT）：

　　1誘導接觸（第0天）

　　受試物組：將頸背部去毛區(qū)（2cm×4cm)中線兩側(cè)劃定三個對稱點，每點皮內(nèi)注射0.1mL下述溶液：

　　——第1點1：1（體積比）FCA/水或生理鹽水的混合物；

　　——第2點耐受濃度的受試物；

　　——第3點用1：1（體積比）FCA/水或生理鹽水配制的受試物，濃度與第2點相同。

　　對照組：注射部位同受試物組，每點皮內(nèi)注射0.1mL下述溶液：

　　——第1點1：1（體積比）FCA/水或生理鹽水的混合物；

　　——第2點未稀釋的溶劑；

　　——第3點用1：1（體積比）FCA/水或生理鹽水配制的濃度為500g/L的溶劑。

　　2誘導接觸（第7天）

　　將涂有0.5g(mL)受試物的2cm×4cm濾紙敷貼在上述再次去毛的注射部位，然后用兩層紗布，一層玻璃紙覆蓋，無刺激膠布封閉固定48h。對無皮膚刺激作用的受試物，可加強致敏，對照組和試驗組動物于第二次誘導接觸前24h在注射部位涂抹10%十二烷基硫酸鈉(SLS)0.5mL。對照組僅用溶劑作誘導處理。

　　3激發(fā)接觸（第21天）

　　將豚鼠軀干部去毛，用涂有0.5g（mL）受試物的2cm×2cm濾紙片敷貼在去毛區(qū)，然后再用兩層紗布，一層玻璃紙覆蓋，無刺激膠布封閉固定24h。對照組動物作同樣處理。如激發(fā)接觸所得結(jié)果不能確定，可在第一次激發(fā)接觸1周后進行第二次激發(fā)接觸。對照組作同步處理。