骨髓細胞微核試驗是什么 試驗方法有哪些
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2025.01.17
?骨髓細胞微核試驗是一種重要的毒理學檢測方法，能夠快速、靈敏地檢測物質對細胞核遺傳結構的改變情況，對評價某種物質對DNA損傷的影響具有重要的毒性評價價值?。
骨髓細胞微核試驗介紹
骨髓細胞微核試驗是一種?檢測染色體畸變或評價化學物質誘導染色體損傷的實驗方法??。它基于染色體損傷和干擾細胞有絲分裂的化學毒物會導致微核形成的原理?。
微核是存在于細胞中主核之外的一種顆粒，大小相當于細胞直徑的1/20\~1/5，呈圓形或杏仁狀，其染色與細胞核一致?。在間期細胞中，微核可以出現一個或多個，通常認為是細胞內染色體斷裂或紡錘絲受影響而在細胞有絲分裂后期滯留在細胞核外的遺傳物質?。
骨髓細胞微核試驗最常用的是嚙齒類動物（如小鼠）骨髓嗜多染紅細胞（PCE）微核試驗?。這是因為嗜多染紅細胞是分裂后期的紅細胞，此時紅細胞的主核已經排出，胞質內含有核糖體，吉姆薩（Giemsa）染色呈灰藍色，微核容易辨認，且微核自發(fā)率低?。
試驗過程中，通過給嚙齒類動物染毒，然后處死取其骨髓，經過制片、固定、染色后，在顯微鏡下計數PCE中的微核數量，以此來評價化學物質的遺傳毒性?。
此外，骨髓細胞微核試驗具有簡便、快速的特點，可作為誘突變物的初篩試驗方法?。通過觀察骨髓細胞中的微核率，可以檢驗藥物是否具有致突變作用，為化學物質的安全性評估提供重要依據?。
骨髓細胞微核試驗方法
?。?）?選擇實驗動物?：
常用小鼠，體重在20-24克，雌雄均可。
每組動物10只，可設3-4個劑量組，同時設陰性對照組和陽性對照組?。
?。?）?染毒途徑與劑量?：
染毒途徑依受試物定，選擇與人時間接觸方式相似的方式。
染毒劑量以LD50的1/5-1/50為好?。
?。?）?骨髓細胞微核分析片準備?：
迅速取胸骨及部分肋骨，剔除肌肉組織及表面結締組織。
沿胸骨剪掉多余肋骨，用濾紙或紗布將胸骨擦凈。
取載波片，標記后，用滴管取小牛血清在載波片一端滴一滴小牛血清。
剪去骨骺端，用彎止血鉗將骨髓擠至盛有一滴小牛血清的玻片上，混勻，用推片將其推成薄厚均勻的片子，自然干燥?。
?。?）?固定與染色?：
片膜干后用甲醇固定15分鐘，晾干。
干燥后用吸管吸取10%Giemsa染液滴滿載玻片，染色10-15分鐘。
染色完畢，自來水沖洗載波片背面?。
?。?）?觀察與計數?：
通常計數PCE（嗜多染紅細胞）細胞中的微核，因為紅細胞在成熟前會將主核排出，而保留微核?。
使用顯微鏡觀察并計數微核數量。
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